Advanced DNA RNA Transfection Reagent

一、質粒DNA準備

1、質粒DNA濃度700ng/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水；②無內毒素），我用QIAGEN試劑盒除去的內毒素

二、操作流程

1、先將細胞接種到細胞培養板，細胞匯合度在70%左右，再進行轉染。

2、復合物制備：將質粒DNA與ZetaLife公司AdvancedDNARNA貨號AD600150轉染試劑按照1:1（12ug:12ul）關系直接混合，用移液器吹吸10-15次混勻，室溫靜止10-15分鐘。

3、將復合物加入*培養基的細胞培養板，并輕輕混勻，放入培養箱中繼續培養（不建議把復合物加入到無血清的培養基里面，我后期會進一步摸索此條件）。

4、轉染24小時后對細胞進行正常換液。

5、質粒DNA轉染48小時后熒光檢測轉染效率

三、注意事項：

1本轉染方法不適用在下面轉染試劑的轉染如：lipo3000、,FuGENE6、FuGENEHD、Effectene等；

2細胞培養ZetaLifez7181-500胎牛血清，Gibco的DMEM;

四、美國ZetaLife公司AdvancedDNARNA轉染試劑信息：

產品名稱

貨號

規格

數量

報價

AdvancedDNARNA轉染試劑

AD600025

0.25ML

1

1590

AdvancedDNARNA轉染試劑

AD600050

0.5

1

2390

AdvancedDNARNA轉染試劑

AD600075

0.75

1

2890

AdvancedDNARNA轉染試劑

AD600150

1.5ML

1

4490

AdvancedDNARNA轉染試劑

AD600500

5ML

1

AdvancedDNARNA轉染試劑

AD601000

10ML

1