人膽囊癌細胞

GBC-SD(GBCSD)；人膽囊癌細胞詳細說明

細胞名稱 GBC-SD(GBCSD)；人膽囊癌細胞

生長特性 貼壁生長

形態特性 上皮樣

產品規格 1×10^6 cells/瓶

培養條件 RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

生長條件 氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

背景資料 GBC-SD 細胞株是王展明等2000年從一位61歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的。細胞的形狀有多邊形、紡錘形和正方形。 分泌CEA和CA19-9。倍增時間大約為21.4小時?？梢浦驳铰闶?，生成的腫瘤與原發腫瘤相似。

GBC-SD(GBCSD)；人膽囊癌細胞常規說明：

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎培養液

細胞質檢情況：不含細菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細胞后，如細胞狀態不佳，或培養中遇到問題，煩請當天盡快聯系，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據，請務必重視。

一、 GBC-SD(GBCSD)；人膽囊癌細胞復蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。

2. 把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中（用培養基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養基的10cm培養皿中前后左右輕輕搖動，使培養皿中的細胞均勻分布。

4. 標好細胞種類和日期、培養人名字等，放到CO2培養箱中培養，細胞貼壁后換培養基。

5. 3天換一次培養基。

二、 GBC-SD(GBCSD)；人膽囊癌細胞傳代

1. 培養皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。

2. 把原有培養基吸掉。

3. 加適當的胰蛋白酶（能覆蓋細胞就行），消化1-2分鐘。

4. 細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養基終止消化。

5. 用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。

6. 把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉離心5分鐘。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培養基，把細胞都吹起來。

8. 根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。繼續培養。

三、 GBC-SD(GBCSD)；人膽囊癌細胞凍存

把細胞消化下來并離心（同上）。用配好的凍存液把細胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細胞種類，凍存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃過夜，然后放到液氮灌中保存。

凍存液的配制： 70%的*培養基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

要注意的就是無菌操作！